苏州小鼠抗IgE受体抗体elisa试剂盒要如何使用

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小鼠抗IgE受体抗体elisa试剂盒用抗小鼠IgE单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的IgE与单抗结合，加入酶标抗体，形成免疫复合物连接在板上，加入酶底物TMB，出现蓝色，加终止液硫酸，颜色变黄，在450nm处测OD值，IgE浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中IgE浓度。小鼠抗IgE,液体敷料,优质抗原,抗体,苏州培养基,生物细胞治疗

　　小鼠抗IgE受体抗体elisa试剂盒准备试剂与收集血样：

　　1.收集标本：血清、血浆(肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存，避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液作1：10稀释(取20ul，加标本稀释液180ul,稀释10倍)。

　　2.标准品液配制：使用前加入0.5ml蒸馏水混匀，配成2500ng/ml的溶液。设标准管8管，第1管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在第1管中加入2500ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。

　　3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。

　　4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释(示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)

　　检测程序

　　1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

　　2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。。

　　3.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃60分钟。

　　4.洗板：同前。

　　5.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。

　　6.每孔加入100ul终止液混匀。

　　7.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

　　结果计算与判断小鼠抗IgE,液体敷料,苏州优质抗原,抗体,培养基,生物细胞治疗

　　1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。

　　2.以标准品250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、3.9、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。

　　3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应IgE含量，再乘上稀释倍数即可。

　　试剂盒性能

　　1.灵敏度：小的IgE检测浓度小于2ng/ml。

　　2.特异性：可同时检测重组或天然的小鼠IgE。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。

　　3.重复性：板内、板见变异系数均小于12%。

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